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簡述一下invitrogen膠原蛋白酶的凍干過程
瀏覽次數(shù):1813發(fā)布日期:2022-05-23
  invitrogen膠原蛋白酶是一種從白色念珠菌分離出來的強(qiáng)力蛋白溶解酶,具有很高的比活性,是DNA提取的關(guān)鍵試劑。該酶在較廣的pH范圍(4?12.5)內(nèi)及高溫(50?70°C)均有活性,用于質(zhì)?;蚧蚪MDNA、RNA的分離。在DNA提取中,主要作用是酶解與核酸結(jié)合的組蛋白,使DNA游離在溶液中,隨后用不同方法進(jìn)行抽提,除去雜質(zhì),收集DNA。EDTA等螯合劑或SDS等去垢劑均不能使之失活。invitrogen膠原蛋白酶貯存液一般為10mg/ml或20mg/ml。貯存于一20°C。invitrogen膠原蛋白酶溶液為無色透明,如出現(xiàn)沉淀就不能再使用。
 
  使用凍干機(jī)凍干invitrogen膠原蛋白酶的凍干過程中預(yù)凍階段內(nèi)溫度下降曲線與隔板溫度下降曲線基本保持一致,只是其斜率略低。
 
  在一次干燥階段,樣品溫度隨隔板升溫而升溫,隔板溫度達(dá)到預(yù)定溫度后基本維持不變,而樣品溫度波動(dòng)較大,10.5h后樣品溫度波動(dòng)幅度逐漸縮小。
 
  在二次干燥階段,樣品溫度隨隔板上升斜率較一次干燥階段有所提高,隔板溫度達(dá)到預(yù)定溫度后基本維持不變,而樣品溫度有小幅波動(dòng),22h后樣品溫度逐漸接近隔板溫度。
 
  在一階段和二階段,冷凝器溫度基本維持在-45℃~-40℃,冷凝器在二階段干燥階段溫度波動(dòng)比一階段干燥階段明顯減少。
 
  在預(yù)凍階段內(nèi),凍干倉壓力下降迅速。在一次干燥階段的初始階段(4.0~7.5 h),凍干倉壓力隨隔板升溫而提高;在中間階段(7.5~12.0h),凍干倉壓力波動(dòng)較大,與樣品溫度波動(dòng)有一定的一致性;在結(jié)尾階段(12.0~13.5h),凍干倉壓力波動(dòng)漸趨平靜。
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