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Thermo Pierce™ 細(xì)胞表面蛋白分離試劑盒 分子生物試劑

  • 更新時間:  2023-07-27
  • 產(chǎn)品型號:  89881
  • 簡單描述
  • Thermo Pierce™ 細(xì)胞表面蛋白分離試劑盒
    Thermo Scientific 細(xì)胞表面蛋白分離試劑盒是一整套試劑,用于對哺乳動物細(xì)胞蛋白進行選擇性生wu素化,并隨后進行純化,以排除細(xì)胞內(nèi)蛋白。
詳細(xì)介紹

Thermo Pierce™ 細(xì)胞表面蛋白分離試劑盒


Thermo Scientific 細(xì)胞表面蛋白分離試劑盒是一整套試劑,用于對哺乳動物細(xì)胞蛋白進行選擇性生wu素化,并隨后進行純化,以排除細(xì)胞內(nèi)蛋白。

細(xì)胞表面蛋白分離試劑盒的特點:

分離細(xì)胞表面蛋白—降低總細(xì)胞蛋白復(fù)雜性
高效回收標(biāo)記蛋白—通過可裂解生wu素,可幾乎回收分離的細(xì)胞表面蛋白
便利—一個試劑盒中提供了所有試劑以及細(xì)胞表面膜蛋白標(biāo)記、細(xì)胞裂解和純化的完整說明
Western 印跡應(yīng)用—在 SDS-PAGE 緩沖液中回收的蛋白可直接上樣至聚丙烯酰胺凝膠
穩(wěn)健的系統(tǒng)—方案設(shè)計用于多種細(xì)胞系,包括 NIH 3T3、HeLa、C6 和 A431

該試劑盒可高效標(biāo)記具有可獲取賴氨酸殘基和充分細(xì)胞外暴露的蛋白。分離程序使用不可透過細(xì)胞的可裂解生wu素化試劑(Sulfo-NHS-SS-生wu素)來標(biāo)記完整貼壁或懸浮細(xì)胞表面的蛋白上暴露的伯胺。之后收獲并水解經(jīng)處理的細(xì)胞,并使用 Thermo Scientific NeutrAvidin 瓊脂糖樹脂對標(biāo)記的表面蛋白進行親和純化。分離出的細(xì)胞表面蛋白含一個原來標(biāo)記伯胺、但不再生wu素化(生wu素保持連結(jié)至樹脂)的小型、非反應(yīng)標(biāo)記。該試劑盒含足以進行八次實驗的試劑,每次實驗涉及裝有融合細(xì)胞的四個 T75 瓶。

細(xì)胞表面蛋白分離試劑盒已成功用于標(biāo)記和純化細(xì)胞表面蛋白。在一次實驗中,使用或不使用 Sulfo-NHS-SS-生wu素處理 HeLa 細(xì)胞,并根據(jù)試劑盒程序?qū)?xì)胞進行處理。通過 Western 印跡分析收集的組分,包括洗脫、流過物和洗脫后凝膠。在用生wu素標(biāo)記處理的細(xì)胞的洗脫組分中鑒定出四種細(xì)胞表面蛋白。這些蛋白包括表皮生長因子受體 (EGFR)、胰島素樣生長因子-1 受體 β IGF (IGF-1β)、整合素 1 和整合素 5。與之形成鮮明對比的是,在未標(biāo)記細(xì)胞的洗脫組分中未鑒定出這些蛋白;未標(biāo)記蛋白僅在流過物中發(fā)現(xiàn)。此外,還在來自標(biāo)記細(xì)胞的流過物組分中鑒定出一些細(xì)胞表面蛋白。由于空間位阻,這些蛋白很可能未被標(biāo)記。洗脫后凝膠組分中存在的已捕獲蛋白量可忽略不計,表明已捕獲蛋白回收率將近 。在所有檢測樣品的洗脫組分中檢測到了痕量熱休克蛋白 90 (Hsp90),表明細(xì)胞表面與細(xì)胞內(nèi)蛋白標(biāo)記具有特異性。



Thermo Pierce™ 細(xì)胞表面蛋白分離試劑盒



規(guī)格

數(shù)量
1 個試劑盒
足夠用于
8 次反應(yīng)
Buffer
裂解緩沖液
形式
液體、粉末
產(chǎn)品線
Pierce™
試劑類型
細(xì)胞裂解緩沖液、去污劑溶液、亞細(xì)胞分離
產(chǎn)品類型
分離試劑盒

內(nèi)容與儲存

接收后,在 4°C 下儲存試劑盒。產(chǎn)品在環(huán)境溫度下運輸。




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